吉林大學(xué)自考本科生物制藥專業(yè)：藥物分析學(xué)

第一章  緒  論

一、 學(xué)習(xí)要點

  1、掌握生物藥物的定義

  2、掌握生物藥物檢驗工作的基本程序與方法

  3、熟悉生物藥物的分類

4、熟悉藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以及藥典有關(guān)規(guī)定

5、了解生物藥物分析的任務(wù)

二、名詞解釋

1、生物藥物：是利用生物體、生物組織或器官等成分，綜合應(yīng)用多門學(xué)科的如生物學(xué)、生物化學(xué)等的原理和方法，特別是采用現(xiàn)代生物技術(shù)，進(jìn)行加工、制造而形成的天然生物活性物質(zhì)以及人工合成或半合成的天然物質(zhì)類似物，用于預(yù)防、治療以及診斷疾病。

2、生化藥物：從動物、植物及微生物等生物體分離純化得到的生化活性物質(zhì)，或者用化學(xué)合成、微生物合成及現(xiàn)代生物技術(shù)制得的生命基本物質(zhì)及其衍生物、降解物、大分子的結(jié)構(gòu)修飾物等，以及來自生物體或構(gòu)成生物體的一些基本成分。

3、生物技術(shù)藥物：用現(xiàn)代生物技術(shù)研制的藥物。

4、生物制品：一般指的是用微生物（包括細(xì)菌、噬菌體、立克次體、病毒等）、微生物代謝產(chǎn)物、原蟲、動物毒素、人或動物的血液或組織等直接加工制成，或用現(xiàn)代生物技術(shù)方法制成，作為預(yù)防、治療、診斷特定傳染病或其他有關(guān)疾病的免疫制劑，包括各種疫苗、抗血清（免疫血清）、抗毒素、類毒素、免疫制劑（如胸腺肽、免疫核酸等）、診斷試劑等。

5、藥典：記載著各種藥品的標(biāo)準(zhǔn)，是一個國家關(guān)于藥品標(biāo)準(zhǔn)的法典，是國家管理藥品生產(chǎn)與質(zhì)量的依據(jù)，一般由國家衛(wèi)生執(zhí)行部門主持編纂、頒布實施。藥典和其他法令一樣具有約束力。

6、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（標(biāo)準(zhǔn)品）：需要在進(jìn)行測定的同時，用一已知效價的制品作為對照來校正試驗結(jié)果，這種對照品就是標(biāo)準(zhǔn)品。在國際上將標(biāo)準(zhǔn)品分為兩類：國際標(biāo)準(zhǔn)品和國際生物參考試劑。國內(nèi)分為，國家標(biāo)準(zhǔn)品和國家參考品。

7、藥物分析學(xué)科：一門研究與發(fā)展藥物質(zhì)量控制的方法學(xué)科，是整個藥學(xué)科學(xué)領(lǐng)域中一個重要組成部分。藥物分析的基本任務(wù)是檢驗藥品質(zhì)量，保障人們用藥安全、合理、有效。

三、應(yīng)掌握的知識點

1、生物藥物主要包括生化藥物、生物技術(shù)藥物和生物制品等。

2、在生物藥物的生產(chǎn)過程中要對各個環(huán)節(jié)嚴(yán)加控制，還要有嚴(yán)格的質(zhì)量管理規(guī)范，以確保生物藥物的均一性、有效性、和穩(wěn)定性。

3、《中國生物制品規(guī)程》是我國生物制品的國家標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)法規(guī)。生物制品規(guī)程包括生產(chǎn)規(guī)程和檢定規(guī)程兩方面的內(nèi)容。

4、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是藥品現(xiàn)代化生產(chǎn)和質(zhì)量管理的重要組成部分，是藥品生產(chǎn)、供應(yīng)、使用和監(jiān)督管理部門共同遵循的法定技術(shù)依據(jù)，也是藥品生產(chǎn)和臨床用藥水平的重要標(biāo)志。

5、對藥品質(zhì)量控制的全過程起指導(dǎo)作用的法令性文件有GLP、GMP、GSP、GCP四個科學(xué)管理規(guī)范。

6、中國藥典的內(nèi)容：凡例，正文，附錄，索引。

7、生物藥物檢驗的基本程序一般為取樣、鑒別、檢查、含量（效價）測定、寫出檢驗報告等。

8、國際上將標(biāo)準(zhǔn)品分為兩類：國際標(biāo)準(zhǔn)品和國際生物參考試劑。國內(nèi)將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)也分為兩類：國家標(biāo)準(zhǔn)品和國家參考品。

9、藥物分析的基本任務(wù)是檢驗藥品質(zhì)量，保障人們用藥安全、合理、有效。

10、生物制品一般指是用微生物（包括細(xì)菌，噬菌體，立克次氏體，病毒等），微生物代謝產(chǎn)物，原蟲，動物毒素，人或動物的血液或組織等直接加工制成，或用現(xiàn)代生物技術(shù)方法制成，作為預(yù)防，治療。診斷特定傳染病或其他相關(guān)疾病的免疫制劑，包括各種疫苗，抗血清（免疫血清），抗毒素，類毒素，免疫制劑（如胸腺肽，免疫核酸等，診斷試劑等。如，乙肝疫苗，卡介苗，白喉類毒素，狂犬病免疫球蛋白，白蛋白，結(jié)核菌素等。

11、生物藥物的用途：（1）作為治療藥物（2）作為預(yù)防藥物（3）作為診斷藥物

四、重點與難點

1、生物藥物檢驗的基本程序：

 （1）藥物的取樣

 （2）藥物的鑒別試驗

 （3）藥物的雜質(zhì)檢查

 （4）藥物的安全性檢查

 （5）藥物的含量（效價）測定

 （6）檢驗報告的書寫

2、生物藥物的性質(zhì)：

 （1）在化學(xué)構(gòu)成上，生物藥物十分接近于體內(nèi)的正常生理物質(zhì)，進(jìn)入體內(nèi)后也更易為機體所吸收利用和參與人體的正常代謝與調(diào)節(jié)。

 （2）在藥理學(xué)上，生物藥物具有更高的生化機制合理性和特異治療的有效性。

 （3）在治療上，生物藥物具有藥理活性高、針對性強、毒性低、副作用小、療效可靠及營養(yǎng)價值高等特點。

 （4）生物藥物的有效成分在生物材料中濃度都很低，雜志的含量相對比較高。

 （5）生物藥物常常是一些生物大分子，它們不僅分子量大，組成、結(jié)構(gòu)復(fù)雜，而且具有嚴(yán)格的空間構(gòu)象，以維持其穩(wěn)定的生理功能。

 （6）生物藥物對熱、酸、堿、重金屬及pH變化均比較敏感，各種理化因素的變化易對生物活性產(chǎn)生影響。

  3、生物藥物分析與檢驗的特點：

 （1）需要進(jìn)行相對分子質(zhì)量的測定

 （2）需檢查生物活性

 （3）需做安全性檢查

 （4）需做效價測定

 （5）要用生化法確證結(jié)構(gòu)

第二章  酶分析法

一、學(xué)習(xí)要點

1、掌握酶活力測定的原理、方法和藥物分析實例

2、掌握酶法分析的原理、檢測方法和藥物分析實例

3、熟悉酶活力測定中應(yīng)注意的主要問題

4、了解酶及酶分析法在生物藥物分析中的應(yīng)用

二、名詞

1、酶活力：指在一定條件下，酶所催化的反應(yīng)速度。

2、酶反應(yīng)速度：用單位時間內(nèi)反應(yīng)底物的減少或產(chǎn)物的增加來表示

3、酶的活性單位（國際單位為U）：是指在25℃下，以最適的底物濃度、最適的緩沖液離子強度以及最適的pH值諸條件下，每分鐘能轉(zhuǎn)化一個微摩爾底物的酶量定為一個活性單位。酶的比活性即定位一毫克酶的活性單位。

4、取樣測定法：是在酶反應(yīng)開始后不同的時間，從反應(yīng)系統(tǒng)中取出一定量的反應(yīng)液，并用適當(dāng)?shù)姆椒ㄍＶ蛊浞磻?yīng)后，再根據(jù)產(chǎn)物和底物在化學(xué)性質(zhì)上的差別，選用適當(dāng)?shù)臋z測方法進(jìn)行定量分析，求得單位時間內(nèi)酶促反應(yīng)變化量的方法。

5、酶偶聯(lián)測定法：用過量、高度專一的“偶聯(lián)工具酶”使被測酶反應(yīng)能繼續(xù)進(jìn)行到某一可直接、連續(xù)、簡便、準(zhǔn)確測定階段的方法。

6、酶法分析：是一種以酶為分析工具或試劑的分析方法。分析的對象可以是酶的底物、輔酶活化劑甚至是酶的抑制劑。包括終點測定法和反應(yīng)速度法。

7、酶活力測定：以酶作為分析對象，也就是根據(jù)需要對樣品進(jìn)行酶含量或活力的測定。

三、應(yīng)掌握的知識點

1、酶分析法包括酶活力測定法和酶法分析。

2、酶的反應(yīng)速度可以用單位時間內(nèi)反應(yīng)底物的減少或產(chǎn)物的增加來表示，酶的反應(yīng)速度愈快所表示的酶活力愈高。

3、測定酶活力，可用物理法、化學(xué)法或酶分析法等方法。

4、酶的比活性定為一毫克酶的活性單位。

5、酶促反應(yīng)的基本要求是：所有待測定的酶分子都應(yīng)該能夠正常發(fā)揮它的作用。確定酶促反應(yīng)反應(yīng)條件時應(yīng)考慮以下因素：底物，pH值，溫度，輔助因子，空白和對照。

6、一般選用底物的濃度S=100Km，因為在這種情況下反應(yīng)速度可達(dá)最大速度的99%。

7、一般而言，溫度變化1℃，酶反應(yīng)速度可能相差5%左右。因此，試劑酶促反應(yīng)中，溫度變動應(yīng)控制在+0.1℃以內(nèi)。酶反應(yīng)溫度通常選用25℃、30℃、37℃。

8、酶活力的測定方法按取樣和檢測的方式有取樣測定法和連續(xù)測定法。

9、取樣測定法常用的檢測方法有紫外-可見分光光度計法，熒光分析法等。

10、酶分析法中連續(xù)測定法常用的檢測方法有紫外-可見分光光度計法，熒光分析法、旋光度法、酶偶聯(lián)測定法以及電化學(xué)測定法和放射化學(xué)法。

11、熒光分析法的原理是如果酶反應(yīng)的底物與產(chǎn)物之一具有熒光，那么熒光變化的速度可代表酶反應(yīng)速度。

12、酶的反應(yīng)速度可以用單位時間內(nèi)底物的減少或者產(chǎn)物的增加來表示，但以分析產(chǎn)物為好，因為產(chǎn)物從無到有，只要測定方法靈敏，準(zhǔn)確度可以很高。

13、酶反應(yīng)進(jìn)程曲線：在反應(yīng)最初階段，底物或產(chǎn)物的變化量一般隨反應(yīng)時間而線性增加，反應(yīng)速度恒定；但是隨著反應(yīng)時間延長，曲線會逐漸彎曲下來，斜率改變，反應(yīng)速度下降。

14、真正能代表酶催化活性的是反應(yīng)初始階段